Диагностика аллергических заболеваний

Диагностика аллергических заболеваний

Диагностика аллергических заболеваний: оценка уровня IgE - антител

Аллергия - это специфическая повышенная вторичная иммунная реакция на аллерген, которая сопровождается повреждением тканей. Клинически аллергия проявляется как «аллергическая болезнь» с разнообразными синдромами астмы, ринита, дерматита, крапивницы и пр.

 

Атопия - генетически обусловленная, наследственная аллергия на конкретные аллергены при контакте с ними в обычной окружающей среде, проявляющаяся как атопическая болезнь с различными клиническими синдромами. Типичными примерами являются атопическая бронхиальная астма, поллиноз, атопический дерматит.

«Неатопическая» аллергия может возникнуть у любого человека при длительном контакте с аллергоопасными веществами, примером чего может служить профессиональная аллергия.

Существуют некоторые представления в аллергологии до того распространенные, что как бы не требуют каких-либо дополнительных доказательств:

• Аллергия - повышенная («гиперчувствительная») специфическая иммунная реакция на аллерген, сопровождающаяся повреждением тканей .
• К аллергии существует генетическая предрасположенность. Аллергию с наследственной предрасположенностью называют атопией .
• Существует аллергия без наследственной предрасположенности - один из ее видов – анафилактический шок.

Лечение аллергических заболеваний

Для диагностики и лечения аллергических болезней существуют аллергологические и общеклинические методы:

• Аллергологические методы являются аллергенспецифическими и обеспечивают противорецидивную профилактику заболевания как за счет исключения причинного аллергена, так и путем неспецифической и специфической (аллергенами) иммунотерапии. При этом улучшение состояния больного касается атопической болезни со всеми ее проявлениями.
• Клинические методы направлены на диагностику и лечение конкретного клинического аллергического синдрома - того, который общепринято называть болезнью - бронхиальную астму, атопический дерматит, поллиноз и др.
• К сожалению, общеклинический подход к аллергической болезни с возможностью достижения с помощью лекарств ее временной ремиссии, отодвигает специфическое лечение аллергии на второй план, передает больного врачам общей практики, дерматологам, пульмонологам. Длительная лекарственная терапия, в том числе гормональными препаратами, «консервирует», но не ликвидирует аллергию, которая после отмены препаратов проявляется тяжелыми симптомами, устойчивыми к этим препаратам, что в итоге приводит к хроническому течению аллергической болезни.

 Оценка аллергического статуса больных

Для больных аллергией, в отличие от других видов иммунопатологии, характерно наличие аллергического статуса, который включает как клинические, так и лабораторные признаки аллергии. Гиперчувствительность к аллергенам и провоцирующим неспецифическим факторам является основополагающим его признаком, как и аллергии в целом.

В развитии аллергии участвуют IgE - антитела, другие типы антител, Т- и В- лимфоциты. Одним из главных признаков развития аллергической реакции в организме является наличие специфических IgE-антител в значительном количестве в сыворотке крови и секретах, увеличение уровня неспецифического IgE.

 При оценке уровня IgE-антител следует помнить:

-         IgE-антитела могут выявляться не только к одному причинно-значимому аллергену, ответственному за конкретные клинические симптомы, но и к другим аллергенам, поэтому диагноз аллергии должен ставиться в комплексе с анамнезом, клинической картиной, аллергологическим специфическим обследованием;

-          одинаковый уровень специфического IgE (антител) к разным аллергенам не говорит об их одинаковом клиническом значении, так как разные аллергены отличаются по способности связывать IgE-антитела;

-          отрицательный тест на IgE-антитела к какому-либо аллергену не исключает их значимости для клиники, так как возможно истощение уровня специфического IgE в острый период заболевания; накопление его клетками системы иммунитета; развитие местной IgE-зависимой реакции, когда в кровь он не поступает; ложноотрицательный результат из-за высоких  показателей антител других классов;

-          отрицательный результат на антитела IgE возможен при развитии аллергии по другим IgE-независимым механизмам или при псевдоаллергии.

Важной противоинфекционной и противоаллергической системой являются антитела секретов слизистых оболочек. Однако, исследуются они редко, хотя слюна и мокрота — доступный материал для исследования.

Отмечена зависимость между присутствием IgE–антител в сыворотке крови и их наличием в слюне в отношении аллергенов домашней пыли, пера подушки. Полученные данные дают основания для более широкого использования методов диагностики аллергии по выявлению антител различных классов в слюне к любым аллергенам. При этом необходимо учитывать, что слюна имеет преимущество, как материал, не требующий специального забора.

Выявление антител в слюне в комплексе с определением антител в сыворотке крови открывает возможности более полного представления роли причинно- значимых аллергенов у больных аллергическими заболеваниями.

Также Вам помогут следующие статьи по данной теме:

Материал http://allergy-cure.ru/prichiny-allergii/

ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ АЛЛЕРГИИ.

Большое значение для выявления сущест­вующей сенсибилизации имеют различные Иммунологи­ческие методыисследования.Преимущество этих методов состоит в их полной безопасности для пациентов.

Все иммунологические методы выявляют только состояние сенсибилизации, т. е. свидетельствуют о том, что у данного индивидуума когда-то уже был контакт с данным антигеном (аллергеном) . Они не могут служить показателем или доказательством того, что именно на данный антиген (аллерген) разовьется аллер­гическая реакция, потому что для реализации аллер­гической реакции кроме сенсибилизации нужен еще ряд дополнительных условий. Так как существует 4 типа сенсибилизации, для диагностических целей необходимо применять несколько методов, позволяющих оценить возможное участие всех четырех типов сенси­билизации.

Для выявленияРеагинового типа(I тип) сенсиби­лизации можно применять следующие реакции:

• радиоаллергосорбентный тест (RAST) , с помощью которого определяют IgE-антитела к различным видам аллергенов;
• радиоиммуносорбентный тест (RIST) , позволяющий определять концентрацию общего IgE. Учитывая, что заболевания реагинового типа сопровождаются увеличением общего IgE, повышенная концентрация этого Ig явится фактором, отчасти подтверждающим участие реагинового механизма, а при отсутствии заболевания —будет служить фактором риска его развития;
• реакция Шульца — Дейла — прямая и пассивная. Прямую реакцию используют обычно в эксперименте. Для этого у сенсибилизированного животного извлекают гладкомышечный орган, помещают в ванночку и налаживают запись его сокращений. Потом в ванночку добавляют аллерген и оценивают интенсивность спазма гладких мышц. Пассивную реакцию можно использовать для выявления реагинов в сыворотке крови больных людей. Для этого в ванночку помещают отрезок подвздошной кишки обезьяны, а затем добавляют сыворотку больного. Антитела фиксируются на кишке. Последующее добавление аллергена при наличии соответствующих Ат вызывает сокращение кишки.
• базофильные тесты — прямой и пассивный;
• тест специфического освобождения гистамина;

Цитотоксический тип(II тип) сенсибилизации мож­но выявить с помощью:

• различных вариантов метода иммунофлюоресценции;
• теста Кумбса при аутоиммун­ной гемолитической анемии;
• радиоиммунологического метода исследования;

Подробней на сайте http://www.medglav.com/allergologiya/

Новые направления в диагностике аллергических заболеваний | #04/06 | Журнал «Лечащий врач»

В настоящее время проблема аллергических заболеваний стоит очень остро в связи с их распространением, в частности заболеваемость аллергическим ринитом приобретает характер эпидемии . Не случайно отечественная школа аллергологов, созданная А. Д.

Т. П. МарковаРЕКЛАМА

В настоящее время проблема аллергических заболеваний стоит очень остро в связи с их распространением, в частности заболеваемость аллергическим ринитом приобретает характер эпидемии . Не случайно отечественная школа аллергологов, созданная А. Д. Адо, большое внимание уделяла и уделяет профилактике и диагностике аллергических заболеваний .

В профилактических и диагностических целях необходимо проведение следующих мероприятий:

• сбор анамнеза;
• лабораторная диагностика аллергических заболеваний: скарификационные, prick- и контактные кожные тесты, внутрикожные тесты, определение общего и специфических иммуноглобулинов (Ig) E, цитометрический аллергенстимулирующий клеточный тест (ЦАСК-тест) , клеточный тест высвобождения медиаторов, тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов (ТТЕЭЛ) , тест дозированной физической нагрузки для диагностики крапивницы физического напряжения;
• цитологическое и бактериологическое исследование мазков из носа и зева;
• диспансерное наблюдение в медицинском учреждении, в том числе наличие медицинской карты или истории болезни, паспорта пациента с аллергическим заболеванием;
• элиминация аллергенов, предполагающая:

  - использование средств борьбы с микроклещами (акаросан, милбиол, акарил, акарекс-тест) ;

  - замена подушек, одеял, матрацев на синтетические, использование специальных наматрасников, наволочек, пододеяльников, предотвращающих контакт с микроклещами;

  - изменение места жительства на период воздействия аллергенов (в частности, пыльцевых аллергенов) ;

  - соблюдение гипоаллергенной диеты.

Перечисленные мероприятия позволяют диагностировать аллергическое заболевание уже на ранних этапах, что способствует профилактике и эффективному лечению данной патологии.

По сведениям разных авторов, в различных странах аллергическими заболеваниями страдают 10-30% населения. По данным ГНЦ Института иммунологии г. Москвы, около 40 000 больных в год обращаются за амбулаторным лечением по поводу аллергии. В последние годы наблюдается рост заболеваемости поллинозами, аллергическим ринитом.

Благодаря открытию в 1967 г. S. Johansson и H. Bennich иммуноглобулинов класса E (IgE) были созданы тест-системы, позволяющие определить общий и аллергенспецифические IgE. Данный вид тестов не умаляет значимости кожных скарификационных и prick-тестов, они применяются для определения причинно-значимых аллергенов перед проведением аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ) . У определенной категории больных (пациенты с аллергодерматозами; пациенты, получающие антигистаминные или кортикостероидные препараты; дети с низким порогом кожной чувствительности; беременные с неспецифической кожной чувствительностью) проводить кожные тесты оказывается затруднительно. Аллергические реакции, в механизме развития которых задействован IgE, получили название истинных, или IgE-опосредованных.

Выбор тест-систем различного производства для определения аллергенспецифических и общего IgE количественным или полуколичественным методом на основе иммуноферментного анализа (ИФА) или хемилюминесцентного MAST-теста в настоящее время достаточно широк. Количественный метод хорошо отработан для определения общего IgE. При полуколичественном методе в зависимости от интенсивности реакции аллергенспецифические IgE оцениваются по классам, примерно соответствующим кожным тестам (1 класс - низкая интенсивность; 2 класс - средняя; 3 - высокая; 4 класс - очень высокая) . Интенсивность реакции 1-го класса не учитывается в качестве положительного результата.

По мнению многих исследователей, MAST-тест (фирма Люминери) более чувствителен и специфичен, позволяет быстрее получить результаты исследования, дает возможность определять необходимые параметры даже у одного больного, не ожидая набора проб. Одним из примеров количественного метода являются такие тест-системы (фирма Биохиммак) , при использовании которых можно определить с помощью построения калибровочной кривой количественные параметры аллергенспецифических IgE.

Результаты кожных проб не всегда совпадают с результатами определения специфических IgE, что связывают с более сложными механизмами формирования кожной реакции. По данным Л. А. Горячкиной, А. С. Демборинской, параллельные исследования результатов кожных проб и MАSТ-теста показывают высокую корреляцию (табл.) .

Несоответствие результатов кожных проб и MAST-теста касается грибковых и пищевых аллергенов, что может быть обусловлено более сложными механизмами реакций на эти аллергены. По данным Л. В. Лусс, ложноположительные результаты при применении MAST-теста отмечались в 6, 4% случаев, что, возможно, связано с перекрестно реагирующими аллергенами .

В 1967 г. международной группой авторов были стандартизированы контактные кожные тесты . Контактный дерматит относится к реакциям гиперчувствительности IV типа (гиперчувствительность замедленного типа) и в своем развитии проходит фазы индукции (сенсибилизации) и клинических проявлений. Роль аллергенов здесь могут выполнять низкомолекулярные белки, соли металлов, гаптены, лекарства.

Сенсибилизированные Th-1 (CD4+-клетки) вырабатывают ?-интерферон (ИФН) , что приводит к активации кератиноцитов, экспрессии HLA-DR, внутриклеточных молекул адгезии - ICAM-1-антигенов, выработке интерлейкина-2 (ИЛ-2) и других провоспалительных цитокинов, вазодилатации и развитию местного воспаления. При контактных кожных пробах химические соединения (аллергены, сульфат никеля, неомицин, формальдегид и т. д.) инкорпорированы на пластинках из геля (поливинилпирролидон, гидрооксипропилцеллюлоза) , которые закрепляются на спине больного.

Стандартная пластинка содержит 24 аллергена (фирма Фармация) , действующая доза измеряется в мкг/см 2. Разработаны специальные стрипы для контакта с жидкими аллергенами, растворенными в петриоляте или масле, воде и т. д. При аллергическом дерматите контакт аллергена с кожей сохраняется в течение 48 ч, после чего стрипы снимают и анализируют результат (размер бляшки в месте контакта) . Оценку реакции проводят следующим образом: - реакции нет; ± - только эритема; + - эритема и инфильтрация; ++ - эритема и не более трех папул; +++ - эритема и более четырех папул; ++++ - эритема и большое количество выраженных папул; +++++ - эритема, пузырьки. Тест используется для диагностики у взрослых и детей. Время чтения результатов может варьировать от 48 ч до 7 дней (поздняя реакция) . Истинная аллергическая реакция формируется через 72-96 ч .

В нашей стране разработаны и применяются аппликационные и капельные пробы, когда на предварительно обработанную 70% спиртом кожу предплечья наносят каплю аллергена или кусочек марли, обработанной аллергеном .

Пищевая непереносимость к молоку, яйцам, рыбе во многом обусловлена IgG4-антителами . Поэтому большое значение имеет диагностика IgG-опосредованных аллергических реакций (II и III тип реакции гиперчувствительности) , часто обозначаемых как пищевая или лекарственная непереносимость, в отличие от истинной IgE-опосредованной пищевой и лекарственной аллергии. Формированию пищевой и лекарственной непереносимости способствует наличие заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) : гастрит, хронический холецистит, хронический панкреатит, колит, дисбактериоз кишечника. Определение IgG-антител к пищевым продуктам методом ИФА (фирмы Биохиммак, Аллергофарма) целесообразно также при рецидивирующей крапивнице, атопическом дерматите, при наличии сопутствующих заболеваний ЖКТ. При целиакии наблюдается пищевая непереносимость глютенсодержащих продуктов (белок глиадин) .

В механизме развития задействованы активированные Т-клетки, вырабатывающие ИЛ-2 и другие цитокины (?-ИФН, фактор некроза опухоли (ФНО-?) , ИЛ-1) , синтезируются специфические IgG-, IgM-, IgA-антитела, что приводит к повышению проницаемости и повреждению слизистой, а в дальнейшем к развитию атрофии .

С истинными IgE-опосредованными реакциями могут быть сходны по клинической симптоматике псевдоаллергические реакции, отличающиеся механизмом развития: оно не связано с выработкой антител или участием сенсибилизированных лимфоцитов. В патогенезе этих реакций выделяют только две стадии - патохимическую и патофизиологическую . При псевдоаллергических реакциях происходит неспецифическое высвобождение медиаторов: гистамина, лейкотриенов, простагландинов. Вещества, приводящие к высвобождению медиаторов, получили название гистаминолибераторов: вещество 48/80, полиамины, вещества, в составе которых имеются NH-группы или алифатическая связь N-гексадефиламид, антибиотики (полимиксин) , кальциевые ионофоры, фрагменты комплемента, кровезаменители, продукты жизнедеятельности гельминтов .

Для диагностики псевдоаллергических реакций предложены ЦАСК-тест и клеточный тест высвобождения медиаторов (FLOW-CAST и EK-CAST) . A. L. DeWeck, M. L. Sanz (2002) показали, что при активации базофилов с помощью аллергена на их поверхности происходит экспрессия CD63-антигенов . При тесте FLOW-CAST (Buhlmann laboratories) используют двойную метку, выделяют лейкоциты и инкубируют их со стимулирующим буфером и аллергеном, анти-IgE-моноклональными антителами (МАТ) с флюоресцентной меткой для идентификации базофилов, после чего добавляют CD63 МАТ и на поверхности базофилов определяют экспрессию CD63-антигенов методом проточной цитометрии. Например, для пищевых и ингаляционных аллергенов тест считается положительным при экспрессии CD63 на поверхности ? 15% базофилов; для ядов насекомых - ? 10%; бета-лактамных антибиотиков и анальгетиков - ? 5% базофилов и индекс стимуляции ? 2. Индекс стимуляции равен отношению %CD63+-базофилов в пробе с аллергеном к количеству этих клеток в пробе без аллергена. Существует аналог теста FLOW-CAST - BASOTEST (Beckton-Dickinson) . ЦАСК-тест специфичен для определения IgE-опосредованной аллергии к ингаляционным аллергенам (кожные пробы нельзя проводить) , пыльцевым , к лекарствам: ?-лактамным антибиотикам , миорелаксантам , анальгетикам , при аллергии к латексу, укусам перепончатокрылых насекомых , при псевдоаллергических реакциях к противовоспалительным нестероидным препаратам , индуцированным компонентами комплемента, плазмой, для определения аутоантител к IgE . Результаты ЦАСК-теста (FLOW-CAST) хорошо коррелируют с результатами кожных проб.

ЕК-CAST основан на определении сульфолейкотриенов (LTC4, LTD4, LTE4) , продуктов распада арахидоновой кислоты, трансформированного 5-липогеназой и глютатион-С-трансферазой после воздействия аллергенов на клетки. Сульфолейкотриены могут синтезироваться базофилами, тучными клетками, макрофагами, эозинофилами, почечными мезенгиальными клетками не только при IgE-опосредованных аллергических реакциях, но и при воспалительных процессах, лекарственной и пищевой непереносимости, псевдоаллергических реакциях. Синтезированный клетками LTC4 метаболизирует до образования LTD4 и LTE4.

Сульфолейкотриены могут определяться в различных биологических жидкостях методом ИФА. Тест считается положительным для пищевых, ингаляционных аллергенов, латекса, ядов насекомых при определении уровня лейкотриенов ? 200 пкг/мл; для лекарственных аллергенов, а также пищевых и химических добавок ?40 пкг/мл.

Описанные тесты высокоспецифичны для диагностики пищевой аллергии и непереносимости, ингаляционной аллергии, когда кожные тесты не могут быть использованы; аллергии на латекс, на ужаление перепончатокрылыми насекомыми; аллергии у детей, лекарственной аллергии и непереносимости, различных псевдоаллергических реакций.

Одновременное использование обоих тестов (CAST-COMBI) возможно для диагностики лекарственной аллергии, пищевой и лекарственной непереносимости, псевдоаллергических реакций, когда сульфолейкотриены определяют в надосадочной жидкости, а на базофилах - экспрессию CD63-антигенов . Такой подход позволяет добиться увеличения чувствительности и специфичности исследования в среднем до 20%. ЦАСК-тест и клеточный тест высвобождения медиаторов могут применяться в диагностике пищевой аллергии и непереносимости, псевдоаллергических реакций, а также для составления гипоаллергенной и элиминационной диеты.

Литература

1. Бельмер С. В. Целиакия//РМЖ. 1996. Т. 4. № 3.
2. Горячкина Л. А., Демборинская А. С. Определение общего и специфического IgE в сыворотках крови аллергических больных методом хемилюминесценции на аппарате MAST-CLA компании «ЛЮМИНЕРИ» /Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии: материалы симпозиума «Новейшие методы диагностики аллергии», 29-31 мая 2001 г., Москва. С. 13-17.
3. Клиническая аллергология/под ред. Р. М. Хаитова. М.: МЕДпресс-информ, 2002. 623 с.
4. Лусс Л. В. Сравнительная оценка диагностической значимости разных методов специфической аллергодиагностики у больных с атопическими заболеваниями /Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии: материалы симпозиума «Новейшие методы диагностики аллергии» 29-31 мая 2001 г., Москва. С. 7-8.
5. Abuaf N., Rajoely B., Ghazouani E. et al. Validation of a flow cytometric assay detecting in vitro basophil activation for the diagnosis of muscle relaxant allergy//J. Allergy. Clin. Immunol. 1999; 104: 411-418.
6. Almqvist C., Pershagen G., Wickman C. M. Socioeconomic status and risck of asthma and sensitisation at four years in a birth cohort. Abstract book of XXIII EAACI Congress, 12-16 June 2004, Amsterdam. Editors: Roy Gerth van Wijk et al. 2004; 961: 283.
7. De Weck A. L., Sanz M. L. Flow cytometric cellular allergen stimulation test. Technical and clinical evaluation of a new diagnostic test in allergy and pseudo-allergy//ACI International. 2002; 14: 5: 204-215.
8. Emenius G. E., Wickman C. M. Indoor environment and asthma in children at four years of age: Data from the Bamse birth cohort. Abstract book of XXIII EAACI Congress, 12-16 June 2004, Amsterdam. Editors: Roy Gerth van Wijk at al. 2004; 52: 22.
9. Gamboa P. M., Sanz M. L., Garcia-Aviles C. et al. Flow-cytometric cellular allergen stimulation test to assess basophil activation in allergic patients to betalactam antibiotics with positive and negative skin test//Allergy. 2001; 56: 68: 5.
10. Jahansson S. G. O., Bennich H. Immunological studies of an atypical (myeloma) immunoglobulin//Immunology. 1967; 13: 381-394.
11. Lashapelle J. M., Maibach H. I. Patch testing and prick testing. A practical guide. With contribution by J. Ring. Ed. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 2003; 189.
12. Sabbah A., Drouet M., Sainte-Laudy J. et al. Apport de la cytometrie en flux dans le diagnostic allergologique//Allergie. Immunol. 1995; 29: 15-21.
13. Sanz M. L., Gamboa P. M., De Weck A. L. Clinical evaluation of in vitro tests in diagnosis of immediate allergic reactions to betalactam antibiotics//ACI International. 2002; 14 (5) : 185-193.
14. Siraganian H. P. Histamine secretion from mast cells and basophils//Trends Pharmacol. Sci. 1983; 4: 432-437.
15. Wedi B., Novacovic V., Koerner M., Kapp A. Chronic urticaria serum induces histamine release, leukotriene production and basophil CD63 surface expression - inhibitory effects of anti-inflammatory drugs//J. Allergy. Clin. Immunol. 2000; 105: 552-560.

Т. П. Маркова, доктор медицинских наук, профессор ИПК Федерального медико-биологического агентства, Москва

Приложения

• Новые направления в диагностике аллергических заболеваний - ТаблицаКорреляция результатов кожных проб и MAST-теста

самые читаемые

Материал с сайта http://www.lvrach.ru/2006/04/4533741/